ELISA-sett fyrir mótefni gegn hringlaga sítrúllíneruðu peptíði (CCP)

Þetta sett greinir mótefni gegn hringlaga sítrúlínuðum peptíðum (CCP mótefni) í sermisýnum úr mönnum með óbeinni aðferð, þar sem hreinsuð hringlaga sítrúlínuð peptíð mótefnavaka eru notuð sem húðunarmótefnavaka.

Prófunarferlið hefst með því að sermisýnið er bætt í hvarfbrunnar sem hafa verið forhúðaðar með áðurnefndum hreinsuðum mótefnavökum, og síðan er ræktunartími liðinn. Á meðan þessari ræktun stendur, ef CCP mótefni eru til staðar í sýninu, munu þau sérstaklega þekkja og bindast hringlaga sítrúlíneruðum peptíð mótefnavökum sem eru húðaðir á örbrunnunum og mynda stöðug mótefnavaka-mótefnafléttur. Til að tryggja nákvæmni síðari skrefa eru óbundnir þættir í hvarfbrunnunum fjarlægðir með þvottaferli, sem hjálpar til við að útrýma hugsanlegum truflunum frá öðrum efnum í serminu.

Næst eru ensímtengingar bættar í hvarfbrunnana. Eftir aðra ræktun munu þessir ensímtengingar festast sérstaklega við núverandi mótefnavaka-mótefnasamstæður og mynda stærra ónæmissamstæðu sem inniheldur mótefnavaka, mótefni og ensímtengingu. Þegar TMB hvarfefnislausn er sett inn í kerfið hvatar ensímið í tengingunni efnahvörf við TMB hvarfefnið, sem leiðir til sýnilegrar litabreytingar. Styrkur þessarar litaviðbragða er í beinu samhengi við magn CCP mótefna sem eru til staðar í upprunalega sermissýninu. Að lokum er örplötulesari notaður til að mæla gleypni (A gildi) hvarfblöndunnar. Með því að greina þetta gleypnigildi er hægt að ákvarða magn CCP mótefna í sýninu nákvæmlega, sem veitir áreiðanlegan grunn fyrir viðeigandi klínískar prófanir og greiningar.